Le 9 septembre 2015, des médecins de l'Institut de recherche scientifique en chien et traumatologie portent ce nom. R. M. Gorbacheva a été le premier à utiliser la méthode de transplantation fécale
Fait partie d'un donneur sain
Quel problème la méthode de greffe de microbiote fécal résout-elle ?
- La méthode est apparue en 1958, lorsque l'américainLe chirurgien Ben Eisman a guéri quatre patients atteints de colite pseudomembraneuse grâce à une greffe fécale. La méthode a été relancée grâce à de nouvelles méthodes de diagnostic, telles que le séquençage 16S. Jusqu'au milieu des années 1990, on croyait que des dizaines de bactéries vivaient dans les intestins. Et avec l'avènement de cette méthode, il s'est avéré qu'il existe des milliers d'espèces dans des proportions différentes. Et chaque personne a une composition individuelle du microbiote. Sachant cela, nous avons décidé d'essayer la méthode de transplantation de microbiote fécal dans la maladie du greffon contre l'hôte (GVHD).
Le séquençage du gène de l'ARNr 16S utilise des données surséquences nucléotidiques de cultures pures isolées. Le gène de l'ARNr 16S a été choisi comme marqueur universel pour l'identification des espèces : il est présent dans les génomes de tous les procaryotes et présente une variabilité relativement faible. La méthode de séquençage du gène de l'ARNr 16S est la « norme de référence » pour la précision de l'identification des espèces bactériennes.
La greffe de microbiote fécal vise àaméliorer les résultats du traitement de la GVHD avec atteinte intestinale. Nous avons d'abord étudié ce qui arrive au microbiote chez les patients atteints de GVHD gastro-intestinale. Par rapport à la période précédant la GCSH (greffe de cellules souches hématopoïétiques), la composition qualitative et quantitative du microbiote change significativement. Le nombre de bactéries anaérobies à métabolisation active diminue fortement et le nombre de bactéries à l'origine de l'inflammation augmente, un déséquilibre prononcé de l'écosystème biologique apparaît. Il y a eu une suggestion : peut-on changer ce déséquilibre en transplantant le microbiote d'un donneur sain ?
Oleg Goloshchapov
— Quelle est la différence entre la GVHD intestinale et les autres maladies inflammatoires de l'intestin traitées avec la même méthode ?
- Dans les motifs de l'apparition.La maladie intestinale inflammatoire (MICI) est un changement génétiquement déterminé du système immunitaire. Ce sont des changements innés qui apparaissent avec le temps. Et la GVHD est une conséquence de la greffe de moelle osseuse, dans laquelle le système immunitaire de quelqu'un d'autre est transplanté chez une personne. Après la transplantation, de nouvelles cellules immunitaires apparaissent dans le corps du patient qui "combattent" avec les tissus d'un organisme inconnu - c'est la maladie du greffon contre l'hôte, GVHD.
Dans le même temps, la réactiongreffon contre tumeur : de nouvelles cellules immunitaires trouvent et détruisent les cellules cancéreuses restantes. Dans de nombreux cas, il s'agit d'un processus nécessaire pour le corps du patient, soumis à un contrôle médicamenteux fiable. Dans le même temps, le tableau clinique de la GVHD avec atteinte intestinale est en effet très similaire à celui des MICI. Et l'image histologique est similaire, et la thérapie.
Oleg Goloshchapov est diplômé de la faculté de médecine deArmavir en 1989 et l'Académie de médecine pédiatrique de Saint-Pétersbourg en 1995. Formé et travaillé en Allemagne et en Autriche. En 2021, il a soutenu sa thèse de doctorat sur le thème "Le rôle de la calprotectine fécale et de la correction du microbiote dans le diagnostic et le traitement de la maladie aiguë du greffon contre l'hôte du tractus gastro-intestinal après allogreffe de cellules souches sanguines hématopoïétiques".
En 2017-2020, les hématologues etréanimateurs SRI DOGIT eux. R. M. Gorbacheva et le Children's Scientific and Clinical Center for Infectious Diseases ont mené une étude qui a évalué l'efficacité clinique de la méthode de transplantation de microbiote fécal (FMT) dans les lésions intestinales sévères chez les patients après une greffe de moelle osseuse.
En 2022, un groupe de médecins qui ont travaillé pour améliorer et mettre en œuvre la méthode FMT dans la pratique régulière de la clinique ont reçu le prix de la vocation pour avoir inventé une nouvelle méthode de traitement.
Dernière chance de salut
Comment avez-vous trouvé la nouvelle méthode ?
— Nous étions basés sur les principes du hors-étiquette.Si l'état du patient est grave, les remèdes traditionnels utilisés en thérapie n'aident pas, la dynamique est négative, alors une méthode est utilisée qui aide une autre catégorie de patients dans une situation similaire. Par exemple, on sait que pour l'infection à Clostridia (une infection causée par la bactérie Clostridium difficile), le traitement traditionnel est la greffe de microbiote fécal. Pourquoi ne pas essayer si d'autres méthodes - immunosuppression, probiotiques, antibiothérapie - ne fonctionnent pas ? Nous avons été les premiers en Russie à transplanter une fillette de 10 ans. Auparavant, la jeune fille avait été traitée sans succès pendant six mois et le pronostic était incertain.
— Comment techniquement cette procédure a-t-elle été réalisée la première fois ?
Nous étions extrêmement peu avertis techniquement. Le greffon a été introduit par FGDS par le canal opérateur de l'endoscope derrière le duodénum et par coloscopie jusqu'au caecum.
- Qu'est-ce qui a changé depuis ?
- Absolument tout - par exemple, les méthodes d'administrationune greffe. Il existe des modes d'administration traditionnels - par le tractus gastro-intestinal supérieur (à l'aide d'un gastroscope) et par le bas (coloscope, lavement ascendant). L'effet clinique est à peu près le même, mais avec les méthodes d'administration instrumentales, les complications surviennent plus souvent - perforations, vomissements, régurgitations, pneumonie. Par conséquent, nous avons décidé d'emprunter une voie différente, afin qu'il n'y ait pas d'anesthésie et de méthodes d'administration invasives instrumentales. Ainsi est née l'idée de la délivrance orale de gélules congelées qui contiennent du microbiote.
greffer
Au début, la question s'est posée de savoir où préparer la greffe,Nous ne le faisons pas dans notre clinique. Nous avons contacté le laboratoire avec lequel nous avons mené des études conjointes sur la calprotectine fécale et avons convenu d'en faire une greffe. Au début, c'était un parcours d'essais et d'erreurs, puis les technologies ont été testées et perfectionnées. Le greffon a d'abord été introduit dans des seringues et devait être inséré à travers un tube ou un FGDS dans les six heures suivant la fabrication. Et ce n'est qu'alors que l'idée des capsules et de la congélation est née. Nous avons réalisé de nombreuses expériences et développé tout un schéma pour ajouter des cryoprotecteurs aux bactéries afin qu'elles ne soient pas détruites lors de la cryoconservation. Nous avons donc obtenu de très bons résultats avec la décongélation et sommes arrivés aux capsules.
Pour créer un greffon en gélules, utilisezdonneur cal. Les donneurs sont des volontaires dont la compatibilité avec le patient est testée sur la base des résultats d'analyses sanguines et de la composition du microbiote. Les matières fécales du donneur sont mélangées avec du glycérol et du sirop de sucre stérile, puis placées dans des gélules doubles en gélatine dure. Les gélules sont conditionnées dans des contenants stériles et placées au congélateur.
- Et maintenant tu n'utilises que des gélules ?
Oui, aussi bien pour les adultes que pour les enfants.La seule chose qui pourrait être un problème est l'âge des enfants, moins de quatre ans. Le plus jeune enfant qui a pris la capsule avait quatre ans. Nous devions nous assurer qu'il ne le mâchait pas, ne l'inhalait pas, mais l'avalait.
J'ai dû demander au labo de le fairecapsules d'entraînement. Ils ont congelé une solution saline et se sont entraînés pendant une semaine pour que le petit patient avale trois à quatre capsules par semaine. Tout s'est déroulé sans complications. Mais qu'en est-il des jeunes enfants ? Dans ce cas, le lavement ascendant peut être une méthode d'administration prometteuse et sûre.
Techniques de greffe
Des recherches coûteuses et des contributions philanthropes
— Comment le fonds AdVita vous soutient-il ?
— AdVita a aidé à presque toutes les étapes.Que faut-il pour réaliser une greffe de microbiote ? Le patient doit passer des tests payants, puis obtenir des gélules. Ils sont également payés, mais fondamentalement, tout l'argent va à l'examen du donneur - il doit être examiné de manière très approfondie, et cela prend énormément d'argent. Par conséquent, après avoir dit au patient qu'une étude doit être faite, nous demandons si le patient est inscrit auprès du fonds. Si c'est le cas, les choses deviennent beaucoup plus faciles. Étude post-transplantation des matières fécales du patient - également AdVita. Et, encore une fois, le séquençage est une étude très coûteuse. AdVita a également aidé ici, grâce à un tel soutien, nous avons avancé dans la science en termes d'étude de la composition du microbiote pendant le FMT.
— À en juger par le nombre de publications, on a le sentiment que vous appliquez massivement cette méthode.
— Il ne s'agit pas d'une application de masse, il en existe de nombreusescontre-indications. La procédure ne peut pas être réalisée après une HSCT, dans laquelle les leucocytes (granulocytes et lymphocytes) n'ont pas encore été restaurés dans le sang périphérique. Il doit y avoir une immunité, car l'introduction d'un grand nombre de microbes peut entraîner des complications infectieuses.
Les patients présentant une défaillance multiviscérale sont exclus.insuffisance - hépatique, rénale, respiratoire. Ce n'est pas une pilule qui guérit tout. Eh bien, l'observance du patient (l'adhésion du patient au traitement, le degré de préparation à suivre les prescriptions et les recommandations du médecin) joue un rôle important. Si le patient doute de l'efficacité, nous n'effectuons pas la procédure.
— En termes d'échelle de préparation et d'ordre d'administration, cela est similaire à la transplantation de moelle osseuse. Est-ce comparable ?
- Absolument comparable.Il y a un paquet de documents, consentement éclairé. Lors de la première visite, le patient vient se familiariser avec la nouvelle méthode de thérapie, de préférence avec des proches. Le patient est informé des principes de la méthode de thérapie, les effets secondaires et indésirables qui peuvent survenir sont expliqués en détail. Ce à quoi vous devez faire attention, ce qui est acceptable, ce qui est inacceptable. Le patient accepte cela, étudie à la maison, consulte des sources ouvertes et prend une décision.
Gélules greffées
— Quel est l'état actuel des travaux sur la méthode dans votre pratique ? La communauté scientifique attend-elle quelque chose de vous ?
Je n'aime pas la routine.Bien sûr, nous prenons nos patients, maintenant nous en avons trois ou quatre, qui ont reçu une thérapie il y a un mois. Mais si vous appliquez la méthode uniquement à des fins thérapeutiques et n'explorez pas plus loin, alors tout sera assez ennuyeux. Il faut de nouveaux points qui n'ont pas encore été explorés, comme la décolonisation des bactéries résistantes aux antibiotiques, lorsque les patients ont à la fois une GVHD avec des lésions intestinales et Klebsiella pneumoniae (une bactérie qui provoque des lésions aiguës des intestins et des voies respiratoires) dans les intestins.
Nous envoyons des rapports sur nos patients à un groupe,qui traite de la transplantation de microbiote à l'Association européenne pour la transplantation de moelle osseuse (EBMT). Ce groupe recueille des données qui incluent toutes les greffes de microbiote effectuées sur des patients atteints de GVHD dans toutes les cliniques. Et il publie des revues de système - de gros articles qui parlent de la méthode, des effets secondaires, de l'efficacité, etc. Et nous ne sommes pas en dernière position ici, car contrairement à des cas isolés d'utilisation dans d'autres pays, nous avons réussi un essai clinique directement randomisé.
— Quels spécialistes ont développé cette méthode avec vous ?
« De nombreux spécialistes y sont impliqués à la fois.Les laborantins sélectionnent et examinent un donneur, fabriquent des capsules. Les médecins hématologues surveillent les patients et les emmènent en conseil où ils discutent d'une éventuelle transplantation de microbiote. Les bactériologistes déterminent si le patient est colonisé par une flore pathogène. Les biologistes moléculaires étudient la composition du microbiote à différentes étapes de la transplantation. Des bioinformaticiens, qui tirent ensuite une conclusion basée sur les résultats. C'est toute une équipe, grâce à laquelle la méthode de l'ordinaire est devenue prometteuse.
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