9. september 2015 ble leger fra Vitenskapelig forskningsinstitutt for hund og traumatologi oppkalt etter. R. M. Gorbacheva var den første som brukte metoden for fekal transplantasjon
En del av en sunn giver
Hvilket problem løser metoden for transplantasjon av fekal mikrobiota?
– Metoden dukket opp i 1958, da den amerikanskeKirurg Ben Eisman kurerte fire pasienter med pseudomembranøs kolitt med en fekal transplantasjon. Metoden har blitt gjenopplivet på grunn av nye diagnostiske metoder, som 16S-sekvensering. Fram til midten av 1990-tallet trodde man at dusinvis av bakterier levde i tarmene. Og med bruken av denne metoden viste det seg at det er tusenvis av arter i forskjellige proporsjoner. Og hver person har en individuell sammensetning av mikrobiotaen. Når vi visste dette, bestemte vi oss for å prøve metoden for transplantasjon av fekal mikrobiota i graft-versus-host disease (GVHD).
16S rRNA-gensekvensering bruker data pånukleotidsekvenser av isolerte rene kulturer. 16S rRNA-genet ble valgt som en universell markør for artsidentifikasjon: det er tilstede i genomene til alle prokaryoter og har relativt lav variasjon. 16S rRNA-gensekvenseringsmetoden er "gullstandarden" for nøyaktigheten av bakterieartsidentifikasjon.
Fekal mikrobiotatransplantasjon tar sikte påforbedre resultatene av terapi for GVHD med intestinal involvering. Vi undersøkte først hva som skjer med mikrobiotaen hos GI GVHD-pasienter. Sammenlignet med perioden før HSCT (hematopoetisk stamcelletransplantasjon), endres den kvalitative og kvantitative sammensetningen av mikrobiotaen betydelig. Antall aktivt metaboliserende, anaerobe bakterier synker kraftig, og antallet bakterier som forårsaker betennelse øker, en uttalt ubalanse i det biologiske økosystemet vises. Det var et forslag: kan vi endre denne ubalansen ved å transplantere mikrobiotaen fra en frisk donor?
Oleg Goloshchapov
— Hva er forskjellen på tarm-GVHD og andre inflammatoriske tarmsykdommer som behandles med samme metode?
- I årsakene til utseendet.Inflammatorisk tarmsykdom (IBD) er en genetisk betinget endring i immunsystemet. Dette er medfødte endringer som viser seg over tid. Og GVHD er en konsekvens av benmargstransplantasjon, der andres immunsystem blir transplantert inn i en person. Etter transplantasjon dukker det opp nye immunceller i pasientens kropp som "kjemper" med vev i en ukjent organisme - dette er graft-versus-host-sykdommen, GVHD.
Samtidig reaksjonengraft versus tumor: nye immunceller finner og ødelegger gjenværende kreftceller. I mange tilfeller er dette en nødvendig prosess for pasientens kropp, underlagt pålitelig medikamentkontroll. Samtidig er det kliniske bildet av GVHD med intestinal involvering faktisk veldig likt IBD. Og det histologiske bildet er likt, og terapi.
Oleg Goloshchapov ble uteksaminert fra medisinsk skole iArmavir i 1989 og St. Petersburg Pediatric Medical Academy i 1995. Utdannet og jobbet i Tyskland og Østerrike. I 2021 forsvarte han sin doktorgradsavhandling om temaet "Rollen til fecal calprotectin and microbiota correction in the diagnose and treatment of acute graft-versus-host disease of the gastrointestinal tract after allogenic transplantation of hematopoietic blood stamceller."
I 2017–2020 har hematologer ogresuscitators SRI DOGIT dem. R. M. Gorbacheva og Children's Scientific and Clinical Center for Infectious Diseases gjennomførte en studie som evaluerte den kliniske effekten av fecal microbiota transplantation (FMT)-metoden i alvorlige intestinale lesjoner hos pasienter etter benmargstransplantasjon.
I 2022 mottok en gruppe leger som arbeidet med å forbedre og implementere FMT-metoden i den vanlige praksisen på klinikken Yrkesprisen for å ha oppfunnet en ny behandlingsmetode.
Siste sjanse for frelse
Hvordan kom du frem til den nye metoden?
— Vi tok utgangspunkt i prinsippene for off-label.Hvis pasientens tilstand er alvorlig, hjelper ikke tradisjonelle midler som brukes i terapi, dynamikken er negativ, så brukes en metode som hjelper en annen kategori pasienter i lignende situasjon. For eksempel vet vi at for clostridiuminfeksjon (en infeksjon forårsaket av bakterien Clostridium difficile), er den tradisjonelle behandlingen fekal mikrobiotatransplantasjon. Hvorfor ikke prøve hvis andre metoder - immunsuppresjon, probiotika, antibiotikabehandling - ikke virker? Vi var de første i Russland som transplanterte en 10 år gammel jente. Før dette hadde jenta vært uten hell i seks måneder og prognosen var tvilsom.
— Hvordan ble denne prosedyren teknisk utført første gang?
Vi var ekstremt teknisk lite kunnskapsrike. Graftet ble introdusert av FGDS gjennom arbeidskanalen til endoskopet bak tolvfingertarmen og ved koloskopi til blindtarmen.
– Hva har endret seg siden den gang?
– Absolutt alt – for eksempel administrasjonsmetodertransplantasjon. Det er tradisjonelle måter for levering - gjennom den øvre mage-tarmkanalen (ved hjelp av et gastroskop) og gjennom den nedre (kolonoskop, stigende klyster). Den kliniske effekten er omtrent den samme, men med instrumentelle administrasjonsmetoder oppstår komplikasjoner oftere - perforeringer, oppkast, oppstøt, lungebetennelse. Derfor bestemte vi oss for å ta en annen vei, slik at det ikke ville være noen anestesi og instrumentelle invasive leveringsmetoder. Dermed ble ideen om oral levering av frosne kapsler som inneholder mikrobiota født.
pode
Først oppsto spørsmålet om hvor man skulle forberede graften,Dette gjør vi ikke i vår klinikk. Vi kontaktet laboratoriet som vi utførte felles studier av fekalt kalprotektin med og ble enige om å gjøre en transplantasjon fra dem. Først var det en prøve- og feilbane, deretter ble teknologiene testet og perfeksjonert. Graftet ble først brakt inn i sprøyter og måtte settes inn gjennom et rør eller FGDS innen seks timer etter fabrikasjon. Og først da ble ideen med kapsler og frysing født. Vi utførte mange eksperimenter og utviklet et helt opplegg for å tilsette kryobeskyttelsesmidler til bakterier slik at de ikke skulle bli ødelagt under kryokonservering. Så vi fikk veldig gode resultater med tining og kom oss til kapslene.
For å lage en transplantasjon i kapsler, brukgiver kal. Donorer er frivillige som testes for kompatibilitet med pasienten basert på resultatene av blodprøver og sammensetningen av mikrobiotaen. Donoravføring blandes med glyserol og steril sukkersirup, og legges deretter i doble harde gelatinkapsler. Kapslene pakkes i sterile beholdere og legges i en fryser.
– Og nå bruker du kun kapsler?
Ja, både for voksne og barn.Det eneste som kan være et problem er barnas alder, under fire år. Det yngste barnet som tok kapselen var fire år. Vi trengte å sørge for at han ikke ville tygge det, ikke inhalere det, men svelge det.
Måtte spørre laboratoriet om å gjøre dettreningskapsler. De frøs saltvann og trente en uke slik at den lille pasienten skulle svelge tre til fire kapsler i uken. Alt gikk uten komplikasjoner. Men hva med yngre barn? I dette tilfellet kan stigende klyster være en lovende og sikker administrasjonsmåte.
Transplantasjonsteknikker
Dyr forskning og filantropbidrag
— Hvordan støtter AdVita-fondet deg?
— AdVita hjalp til i nesten alle ledd.Hva skal til for å utføre en mikrobiotatransplantasjon? Pasienten må bestå betalte tester, og deretter få kapsler. De blir også betalt, men i utgangspunktet går alle pengene til undersøkelsen av giveren - han må undersøkes veldig grundig, og dette krever en enorm sum penger. Etter at vi har fortalt pasienten at det må gjøres en studie, spør vi derfor om pasienten er registrert i fondet. I så fall blir ting mye enklere. Studie etter transplantasjon av pasientens avføring - også AdVita. Og igjen, sekvensering er en veldig kostbar studie. AdVita hjalp også her, takket være slik støtte har vi kommet videre i vitenskapen når det gjelder å studere sammensetningen av mikrobiotaen under FMT.
— Av dømme etter antall publikasjoner er det en følelse av at du bruker denne metoden massivt.
— Dette er ikke en massesøknad, det er mangekontraindikasjoner. Prosedyren kan ikke utføres etter HSCT, hvor leukocytter (granulocytter og lymfocytter) ennå ikke er gjenopprettet i det perifere blodet. Det må være immunitet, fordi introduksjon av et stort antall mikrober kan forårsake smittsomme komplikasjoner.
Pasienter med multippel organsvikt er ekskludert.insuffisiens - lever, nyre, respiratorisk. Dette er ikke en pille som kurerer alt. Vel, etterlevelse (pasientens overholdelse av behandling, graden av beredskap til å oppfylle legens resepter og anbefalinger) spiller en stor rolle. Hvis pasienten tviler på effektiviteten, utfører vi ikke prosedyren.
— Når det gjelder omfanget av forberedelse og administreringsrekkefølge, ligner det på benmargstransplantasjon. Er dette sammenlignbart?
– Absolutt sammenlignbart.Det er en pakke med dokumenter, informert samtykke. Ved første besøk kommer pasienten og blir kjent med den nye terapimetoden, gjerne med pårørende. Pasienten blir fortalt om prinsippene for terapimetoden, bivirkningene og uønskede effektene som kan oppstå er forklart i detalj. Hva du må ta hensyn til, hva er akseptabelt, hva er uakseptabelt. Pasienten samtykker i dette, studerer hjemme, ser på åpne kilder og tar en beslutning.
Podekapsler
— Hva er nå status for arbeidet med metoden i din praksis? Forventer det vitenskapelige miljøet noe av deg?
Jeg liker ikke rutine.Vi tar selvfølgelig pasientene våre, nå har vi tre-fire av dem, som fikk terapi for en måned siden. Men hvis du bruker metoden bare for terapeutiske formål og ikke utforsker videre, vil alt være ganske kjedelig. Det trengs nye punkter som ennå ikke er utforsket, som avkolonisering av antibiotikaresistente bakterier, når pasienter har både GVHD med tarmskade og Klebsiella pneumoniae (en bakterie som gir akutte skader på tarm og luftveier) i tarmen.
Vi sender rapporter om våre pasienter til en gruppe,som omhandler mikrobiotatransplantasjon ved European Association for Bone Marrow Transplantation (EBMT). Denne gruppen samler inn data som inkluderer alle mikrobiotatransplantasjoner utført på GVHD-pasienter på tvers av alle klinikker. Og han publiserer systemanmeldelser – store artikler som snakker om metoden, bivirkninger, effektivitet og mer. Og vi er ikke på sisteplass her, for i motsetning til isolerte tilfeller av bruk i andre land, har vi lykkes med en direkte randomisert klinisk studie.
— Hvilke spesialister utviklet denne metoden sammen med deg?
«Mange spesialister er involvert i det på en gang.Laboratoriearbeidere velger ut og undersøker en donor, lager kapsler. Hematologileger overvåker pasienter og tar dem med til et råd hvor de diskuterer potensiell mikrobiotatransplantasjon. Bakteriologer avgjør om pasienten er kolonisert av patogen flora. Molekylærbiologer studerer sammensetningen av mikrobiotaen på ulike stadier av transplantasjonen. Bioinformatikere, som deretter gjør en konklusjon basert på resultatene. Dette er et helt team, takket være at metoden fra det vanlige har blitt lovende.
Les mer:
Levende organismer har gjort Mars ubeboelig
Den kraftigste sorte hull-kollisjonen i universet beviste Einsteins teori
Knoklene i Midnight Terror Cave ble nøye undersøkt og fant uforklarlige fotspor.