Em 9 de setembro de 2015, médicos do Instituto de Pesquisa Científica de Caninos e Traumatologia receberam o nome. R. M. Gorbacheva foi o primeiro a utilizar o método de transplante fecal
Parte de um doador saudável
Qual problema o método de transplante de microbiota fecal resolve?
- O método surgiu em 1958, quando o americanoO cirurgião Ben Eisman curou quatro pacientes com colite pseudomembranosa com um transplante fecal. O método foi revivido devido a novos métodos de diagnóstico, como o sequenciamento 16S. Até meados da década de 1990, acreditava-se que dezenas de bactérias viviam nos intestinos. E com o advento desse método, descobriu-se que existem milhares de espécies em diferentes proporções. E cada pessoa tem uma composição individual da microbiota. Sabendo disso, resolvemos experimentar o método de transplante da microbiota fecal na doença do enxerto contra o hospedeiro (GVHD).
O sequenciamento do gene 16S rRNA usa dados sobreseqüências de nucleotídeos de culturas puras isoladas. O gene 16S rRNA foi escolhido como marcador universal para identificação de espécies: está presente nos genomas de todos os procariotos e tem variabilidade relativamente baixa. O método de sequenciamento do gene 16S rRNA é o “padrão ouro” para a precisão da identificação de espécies bacterianas.
O transplante de microbiota fecal visamelhorar os resultados da terapia para GVHD com envolvimento intestinal. Primeiro investigamos o que acontece com a microbiota em pacientes com GVHD GI. Em comparação com o período anterior ao TCTH (transplante de células-tronco hematopoiéticas), a composição qualitativa e quantitativa da microbiota muda significativamente. O número de bactérias anaeróbicas metabolizadoras ativas diminui drasticamente e o número de bactérias que causam inflamação aumenta, aparece um desequilíbrio pronunciado do ecossistema biológico. Houve uma sugestão: podemos mudar esse desequilíbrio transplantando a microbiota de um doador saudável?
Oleg Goloshchapov
— Qual a diferença entre DECH intestinal e outras doenças inflamatórias intestinais tratadas com o mesmo método?
- Nos motivos da aparição.A doença inflamatória intestinal (DII) é uma alteração geneticamente determinada no sistema imunológico. Estas são mudanças inatas que aparecem ao longo do tempo. E o GVHD é uma consequência do transplante de medula óssea, no qual o sistema imunológico de outra pessoa é transplantado para uma pessoa. Após o transplante, novas células imunológicas aparecem no corpo do paciente que "brigam" com tecidos de um organismo desconhecido - trata-se da doença do enxerto contra o hospedeiro, GVHD.
Ao mesmo tempo, a reaçãoenxerto versus tumor: novas células imunes encontram e destroem as células cancerígenas remanescentes. Em muitos casos, este é um processo necessário para o corpo do paciente, sujeito a um controle medicamentoso confiável. Ao mesmo tempo, o quadro clínico da DECH com envolvimento intestinal é de fato muito semelhante ao da DII. E o quadro histológico é semelhante e a terapia.
Oleg Goloshchapov formou-se na faculdade de medicina emArmavir em 1989 e Academia Médica Pediátrica de São Petersburgo em 1995. Treinou e trabalhou na Alemanha e na Áustria. Em 2021, defendeu sua tese de doutorado sobre o tema "O papel da calprotectina fecal e correção da microbiota no diagnóstico e tratamento da doença aguda do enxerto contra o hospedeiro do trato gastrointestinal após transplante alogênico de células-tronco hematopoiéticas do sangue".
Em 2017–2020, hematologistas eressuscitadores SRI DOGIT eles. R. M. Gorbacheva e o Children's Scientific and Clinical Center for Infectious Diseases conduziram um estudo que avaliou a eficácia clínica do método de transplante de microbiota fecal (FMT) em lesões intestinais graves em pacientes após transplante de medula óssea.
Em 2022, um grupo de médicos que trabalhou para aprimorar e implementar o método FMT na prática regular da clínica recebeu o Prêmio Vocação por inventar um novo método de tratamento.
Última chance de salvação
Como surgiu o novo método?
— Nos baseamos nos princípios do off-label.Se a condição do paciente é grave, os remédios tradicionais usados na terapia não ajudam, a dinâmica é negativa, então é usado um método que ajuda outra categoria de pacientes em situação semelhante. Por exemplo, sabemos que para infecção por Clostridium (uma infecção causada pela bactéria Clostridium difficile), o tratamento tradicional é o transplante de microbiota fecal. Por que não tentar se outros métodos - imunossupressão, probióticos, antibioticoterapia - não funcionam? Fomos os primeiros na Rússia a transplantar uma menina de 10 anos. Antes disso, a menina havia sido tratada sem sucesso por seis meses e o prognóstico era duvidoso.
—Como esse procedimento foi realizado tecnicamente na primeira vez?
Nós éramos extremamente inexperientes tecnicamente. O enxerto foi introduzido por FGDS através do canal de trabalho do endoscópio atrás do duodeno e por colonoscopia até o ceco.
- O que mudou desde então?
- Absolutamente tudo - por exemplo, métodos de administraçãotransplante. Existem formas tradicionais de entrega - pelo trato gastrointestinal superior (usando um gastroscópio) e pelo inferior (colonoscópio, enema ascendente). O efeito clínico é aproximadamente o mesmo, mas com métodos instrumentais de administração, as complicações ocorrem com mais frequência - perfurações, vômitos, regurgitação, pneumonia. Portanto, decidimos seguir um caminho diferente, para que não houvesse anestesia e métodos de parto invasivos instrumentais. Assim nasceu a ideia da administração oral de cápsulas congeladas que contêm microbiota.
enxerto
A princípio surgiu a dúvida de onde preparar o enxerto,Não fazemos isso em nossa clínica. Entramos em contato com o laboratório com o qual realizamos estudos conjuntos de calprotectina fecal e concordamos em fazer um transplante deles. A princípio foi um caminho de tentativa e erro, depois as tecnologias foram testadas e aperfeiçoadas. O enxerto foi trazido primeiro em seringas e teve que ser inserido através de um tubo ou FGDS dentro de seis horas após a fabricação. E só então nasceu a ideia com cápsulas e congelamento. Fizemos muitos experimentos e desenvolvemos todo um esquema para adicionar crioprotetores a bactérias para que não fossem destruídas durante a criopreservação. Então obtivemos resultados muito bons com o degelo e chegamos às cápsulas.
Para criar um transplante em cápsulas, usedoador cal. Os doadores são voluntários que são testados para compatibilidade com o paciente com base nos resultados dos exames de sangue e na composição da microbiota. As fezes dos doadores são misturadas com glicerol e xarope de açúcar estéril, depois colocadas em cápsulas duplas de gelatina dura. As cápsulas são acondicionadas em recipientes estéreis e colocadas no congelador.
- E agora você usa só cápsulas?
Sim, tanto para adultos como para crianças.A única coisa que pode ser um problema é a idade das crianças, menores de quatro anos. A criança mais nova que tomou a cápsula tinha quatro anos. Precisávamos ter certeza de que ele não iria mastigar, não inalar, mas engolir.
Tive que pedir ao laboratório para fazer issocápsulas de treinamento. Eles congelaram soro fisiológico e treinaram por uma semana para que o pequeno paciente engolisse de três a quatro cápsulas por semana. Tudo correu sem complicações. Mas e as crianças menores? Nesse caso, o enema ascendente pode ser um método de administração promissor e seguro.
técnicas de transplante
Pesquisas caras e contribuições filantrópicas
— Como o fundo AdVita apoia você?
— AdVita ajudou em quase todas as etapas.O que é preciso para realizar um transplante de microbiota? O paciente precisa passar por testes pagos e, em seguida, obter cápsulas. Eles também são pagos, mas basicamente todo o dinheiro vai para o exame do doador - ele precisa ser examinado minuciosamente, e isso custa muito dinheiro. Então, depois que a gente fala para o paciente que precisa fazer um estudo, a gente pergunta se o paciente está cadastrado no fundo. Se assim for, as coisas ficam muito mais fáceis. Estudo pós-transplante das fezes do paciente - também AdVita. E, novamente, o sequenciamento é um estudo muito caro. AdVita também ajudou aqui, graças a esse apoio, avançamos na ciência em termos de estudo da composição da microbiota durante o FMT.
— A julgar pelo número de publicações, há a sensação de que você está aplicando esse método massivamente.
— Esta não é uma aplicação em massa, há muitoscontra-indicações. O procedimento não pode ser realizado após o TCTH, no qual os leucócitos (granulócitos e linfócitos) ainda não foram restaurados no sangue periférico. Deve haver imunidade, pois a introdução de um grande número de micróbios pode causar complicações infecciosas.
Pacientes com falência de múltiplos órgãos são excluídos.insuficiência - hepática, renal, respiratória. Esta não é uma pílula que cura tudo. Bem, a adesão do paciente (a adesão do paciente ao tratamento, o grau de prontidão em seguir as prescrições e recomendações do médico) desempenha um grande papel. Se o paciente duvidar da eficácia, não realizamos o procedimento.
—Em termos de escala de preparo e ordem de administração, é semelhante ao transplante de medula óssea. É comparável?
- Absolutamente comparável.Existe um pacote de documentos, consentimento informado. Na primeira visita, o paciente vem conhecer o novo método de terapia, preferencialmente com familiares. O paciente é informado sobre os princípios do método de terapia, os efeitos colaterais e indesejáveis que podem ocorrer são explicados em detalhes. O que você precisa prestar atenção, o que é aceitável, o que é inaceitável. O paciente concorda com isso, estuda em casa, consulta fontes abertas e toma uma decisão.
cápsulas de enxerto
— Qual é a situação atual do trabalho sobre o método na sua prática? A comunidade científica espera alguma coisa de você?
Eu não gosto de rotina.Claro, levamos nossos pacientes, agora temos três ou quatro deles, que receberam terapia há um mês. Mas se você aplicar o método apenas para fins terapêuticos e não explorar mais, tudo ficará muito entediante. São necessários novos pontos que ainda não foram explorados, como a descolonização de bactérias resistentes a antibióticos, quando os pacientes apresentam tanto GVHD com danos intestinais quanto Klebsiella pneumoniae (bactéria que causa danos agudos ao intestino e trato respiratório) no intestino.
Enviamos relatórios sobre nossos pacientes para um grupo,que trata do transplante de microbiota na European Association for Bone Marrow Transplantation (EBMT). Este grupo coleta dados que incluem todos os transplantes de microbiota realizados em pacientes com GVHD em todas as clínicas. E ele publica revisões do sistema - grandes artigos que falam sobre o método, efeitos colaterais, eficácia e muito mais. E não estamos em último lugar aqui, porque, diferentemente de casos isolados de uso em outros países, conseguimos um ensaio clínico randomizado direto.
—Quais especialistas desenvolveram esse método junto com você?
— Muitos especialistas estão envolvidos nisso ao mesmo tempo.A equipe do laboratório seleciona e examina um doador e produz cápsulas. Os hematologistas observam os pacientes e os levam a uma consulta onde discutem o potencial transplante de microbiota. Os bacteriologistas determinam se o paciente está colonizado por flora patogênica. Os biólogos moleculares estudam a composição da microbiota em vários estágios do transplante. Bioinformáticos que tiram conclusões dos resultados. Esta é uma equipe inteira, graças à qual o método se tornou promissor em relação ao habitual.
Consulte Mais informação:
Organismos vivos tornaram Marte inabitável
A colisão de buracos negros mais poderosa do universo provou a teoria de Einstein
Os ossos na Caverna do Terror da Meia-Noite foram cuidadosamente examinados e encontraram pegadas inexplicáveis.