Transplant fecal: un doctor rus dezvăluie cum terapia neobișnuită ajută la tratarea cancerului

Pe 9 septembrie 2015, medicii Institutului de Cercetare Științifică Dogyt au dat numele. R. M. Gorbacheva a fost primul care a folosit metoda de transplant de fecale

microbiota pentru tratamentul leziunilor intestinale,care rezultă din transplantul de măduvă osoasă. Acum această metodă a fost recunoscută ca eficientă și este folosită în practica clinică. Oleg Goloshchapov - șef al ORiIT nr. 3 al Institutului de Cercetare al DoGiT. R. M. Gorbacheva și șeful grupului de cercetare care a lucrat la metodă.

Parte a unui donator sănătos

Ce problemă rezolvă metoda transplantului de microbiotă fecală?

- Metoda a apărut în 1958, când americanulChirurgul Ben Eisman a vindecat patru pacienți cu colită pseudomembranoasă printr-un transplant fecal. Metoda a fost reînviată datorită noilor metode de diagnosticare, cum ar fi secvențierea 16S. Până la mijlocul anilor 1990, se credea că în intestine trăiau zeci de bacterii. Și odată cu apariția acestei metode, s-a dovedit că există mii de specii în proporții diferite. Și fiecare persoană are o compoziție individuală a microbiotei. Știind acest lucru, am decis să încercăm metoda de transplant de microbiotă fecală în boala grefă-versus-gazdă (GVHD).

Secvențierea genei ARNr 16S utilizează date despresecvențe de nucleotide ale culturilor pure izolate. Gena ARNr 16S a fost aleasă ca marker universal pentru identificarea speciilor: este prezentă în genomul tuturor procariotelor și are o variabilitate relativ scăzută. Metoda de secvențiere a genei ARNr 16S este „standardul de aur” pentru acuratețea identificării speciilor bacteriene.

Transplantul de microbiotă fecală are ca scopîmbunătățirea rezultatelor terapiei pentru GVHD cu afectare intestinală. Am investigat mai întâi ce se întâmplă cu microbiota la pacienții cu GVHD GI. Comparativ cu perioada anterioară HSCT (transplant de celule stem hematopoietice), compoziția calitativă și cantitativă a microbiotei se modifică semnificativ. Numărul de bacterii anaerobe active-metabolizante scade brusc, iar numărul de bacterii care provoacă inflamația crește, apare un dezechilibru pronunțat al ecosistemului biologic. A existat o sugestie: putem schimba acest dezechilibru transplantând microbiota de la un donator sănătos?

Oleg Goloshchapov

— Care este diferența dintre GVHD intestinal și alte boli inflamatorii intestinale care sunt tratate cu aceeași metodă?

- În motivele apariţiei.Boala inflamatorie intestinală (IBD) este o modificare determinată genetic în sistemul imunitar. Acestea sunt schimbări înnăscute care apar în timp. Și GVHD este o consecință a transplantului de măduvă osoasă, în care sistemul imunitar al altcuiva este transplantat într-o persoană. După transplant, în corpul pacientului apar noi celule imunitare care „luptă” cu țesuturile dintr-un organism necunoscut - aceasta este boala grefă contra gazdă, GVHD.

În același timp, reacțiagrefa versus tumoră: celulele imunitare noi găsesc și distrug celulele canceroase rămase. În multe cazuri, acesta este un proces necesar pentru organismul pacientului, supus unui control fiabil al medicamentelor. În același timp, tabloul clinic al GVHD cu implicare intestinală este într-adevăr foarte asemănător cu IBD. Și tabloul histologic este similar, și terapia.

Oleg Goloshchapov a absolvit facultatea de medicină înArmavir în 1989 și Academia de Medicină Pediatrică din Sankt Petersburg în 1995. S-a pregătit și a lucrat în Germania și Austria. În 2021, și-a susținut teza de doctorat pe tema „Rolul calprotectinei fecale și al corecției microbiotei în diagnosticul și tratamentul bolii acute grefă-versus-gazdă a tractului gastrointestinal după transplantul alogenic de celule stem hematopoietice din sânge”.

În 2017–2020, hematologii șiresuscitatori SRI DOGIT-i. R. M. Gorbacheva și Centrul Științific și Clinic al Copiilor pentru Boli Infecțioase au realizat un studiu care a evaluat eficacitatea clinică a metodei transplantului de microbiotă fecală (FMT) în leziunile intestinale severe la pacienții după transplant de măduvă osoasă.

În 2022, un grup de medici care a lucrat pentru a îmbunătăți și a implementa metoda FMT în practica obișnuită a clinicii a primit Premiul Vocație pentru inventarea unei noi metode de tratament.

Ultima șansă de mântuire

Cum ai venit cu noua metodă?

— Ne-am bazat pe principiile off-label.Dacă starea pacientului este gravă, remediile tradiționale care se folosesc în terapie nu ajută, dinamica este negativă, atunci se folosește o metodă care ajută o altă categorie de pacienți într-o situație similară. De exemplu, știm că pentru infecția cu Clostridial (o infecție cauzată de bacteria Clostridium difficile), tratamentul tradițional este transplantul de microbiotă fecală. De ce să nu încercați dacă alte metode - imunosupresia, probioticele, terapia cu antibiotice - nu funcționează? Am fost primii din Rusia care au transplantat o fetiță de 10 ani. Înainte de aceasta, fata fusese tratată fără succes timp de șase luni și prognosticul era îndoielnic.

- Cum a decurs această procedură din punct de vedere tehnic pentru prima dată?

Eram extrem de necunoscuți din punct de vedere tehnic. Grefa a fost introdusă prin FGDS prin canalul de lucru al endoscopului din spatele duodenului și prin colonoscopie în cecum.

- Ce s-a schimbat de atunci?

- Absolut totul - de exemplu, metode de administraretransplant. Există modalități tradiționale de livrare - prin tractul gastrointestinal superior (folosind un gastroscop) și prin cel inferior (colonoscop, clisma ascendentă). Efectul clinic este aproximativ același, dar cu metode instrumentale de administrare apar mai des complicații - perforații, vărsături, regurgitare, pneumonie. Prin urmare, am decis să luăm o altă cale, astfel încât să nu existe anestezie și metode instrumentale invazive de livrare. Astfel a luat naștere ideea livrării orale a capsulelor congelate care conțin microbiotă.

grefă

La început a apărut întrebarea unde să se pregătească altoia,Nu facem asta în clinica noastră. Am luat legătura cu laboratorul cu care am efectuat studii comune ale calprotectinei fecale și am fost de acord să facem un transplant de la ei. La început a fost o cale de încercare și eroare, apoi tehnologiile au fost testate și perfecționate. Grefa a fost adusă mai întâi în seringi și a trebuit să fie introdusă printr-un tub sau FGDS în termen de șase ore de la fabricare. Și abia atunci s-a născut ideea cu capsule și congelare. Am efectuat multe experimente și am dezvoltat o schemă întreagă pentru adăugarea de crioprotectori la bacterii, astfel încât acestea să nu fie distruse în timpul crioconservarii. Asa ca am obtinut rezultate foarte bune la dezghetare si am ajuns la capsule.

Pentru a crea un transplant în capsule, utilizațidonator cal. Donatorii sunt voluntari care sunt testați pentru compatibilitatea cu pacientul pe baza rezultatelor analizelor de sânge și a compoziției microbiotei. Fecalele donatorilor sunt amestecate cu glicerol și sirop de zahăr steril, apoi introduse în capsule de gelatină dublă tare. Capsulele sunt ambalate în recipiente sterile și introduse la congelator.

- Și acum folosești doar capsule?

Da, atât pentru adulți, cât și pentru copii.Singurul lucru care ar putea fi o problemă este vârsta copiilor, sub patru ani. Cel mai mic copil care a luat capsula avea patru ani. Trebuia să ne asigurăm că nu-l va mesteca, nu îl va inhala, ci îl va înghiți.

A trebuit să ceară laboratorului să o facăcapsule de antrenament. Au înghețat soluție salină și s-au antrenat timp de o săptămână, astfel încât micul pacient să înghită trei-patru capsule pe săptămână. Totul a decurs fără complicații. Dar cum rămâne cu copiii mai mici? În acest caz, clisma ascendentă poate fi o metodă promițătoare și sigură de administrare.

Tehnici de transplant

Cercetare costisitoare și contribuții filantrope

— Cum vă sprijină fondul AdVita?

— AdVita a ajutat aproape în toate etapele.Ce este nevoie pentru a efectua un transplant de microbiotă? Pacientul trebuie să treacă teste plătite, apoi să primească capsule. De asemenea, sunt plătiți, dar practic toți banii merg la examinarea donatorului - el trebuie să fie examinat foarte amănunțit, iar asta necesită o sumă uriașă de bani. Prin urmare, după ce îi spunem pacientului că trebuie făcut un studiu, întrebăm dacă pacientul este înregistrat la fond. Dacă da, lucrurile devin mult mai ușoare. Studiu post-transplant al fecalelor pacientului - de asemenea AdVita. Și, din nou, secvențierea este un studiu foarte costisitor. AdVita a ajutat și aici, datorită unui astfel de sprijin, am avansat în știință în ceea ce privește studierea compoziției microbiotei în timpul FMT.

- După numărul de publicații, există sentimentul că aplicați masiv această metodă.

- Aceasta nu este o aplicație de masă, sunt multecontraindicatii. Procedura nu poate fi efectuată după HSCT, în care leucocitele (granulocite și limfocite) nu s-au recuperat încă în sângele periferic. Imunitatea trebuie să fie, deoarece introducerea unui număr mare de microbi poate da complicații infecțioase.

Pacienții cu insuficiență multiplă de organe sunt excluși.insuficiență - hepatică, renală, respiratorie. Aceasta nu este o pastilă care vindecă totul. Ei bine, complianța pacientului (aderarea pacientului la tratament, gradul de pregătire pentru a respecta prescripțiile și recomandările medicului) joacă un rol important. Dacă pacientul se îndoiește de eficacitate, nu efectuăm procedura.

- În ceea ce privește scara pregătirii și ordinea numirii, este similar cu transplantul de măduvă osoasă. Este comparabil?

- Absolut comparabil.Există un pachet de documente, consimțământ informat. La prima vizită, pacientul vine și se familiarizează cu noua metodă de terapie, de preferință cu rudele. Pacientului i se spune despre principiile metodei de terapie, efectele secundare și nedorite care pot apărea sunt explicate în detaliu. La ce trebuie să fii atent, ce este acceptabil, ce este inacceptabil. Pacientul este de acord cu acest lucru, studiază acasă, se uită la surse deschise și ia o decizie.

Capsule de grefă

— Care este stadiul actual al lucrărilor cu privire la metodă în practica dumneavoastră? Ce așteaptă comunitatea științifică de la tine?

Nu-mi place rutina.Bineînțeles, ne luăm pacienții, acum avem trei-patru, care au primit terapie în urmă cu o lună. Dar dacă aplicați metoda numai în scopuri terapeutice și nu explorați mai departe, atunci totul va fi destul de plictisitor. Sunt necesare puncte noi care nu au fost încă explorate, cum ar fi decolonizarea bacteriilor rezistente la antibiotice, atunci când pacienții au atât GVHD cu afectare intestinală, cât și Klebsiella pneumoniae (o bacterie care provoacă leziuni acute ale intestinelor și tractului respirator) în intestine.

Trimitem rapoarte despre pacienții noștri unui grup,care se ocupă cu transplantul de microbiotă la Asociația Europeană pentru Transplantul de Măduvă Osoasă (EBMT). Acest grup colectează date care includ toate transplanturile de microbiotă efectuate pe pacienții cu GVHD în toate clinicile. Și publică recenzii de sistem - articole mari care vorbesc despre metodă, efecte secundare, eficacitate și multe altele. Și nu suntem pe ultimul loc aici, pentru că, spre deosebire de cazuri izolate de utilizare din alte țări, am reușit un studiu clinic direct randomizat.

— Ce specialiști au dezvoltat această metodă împreună cu dumneavoastră?

„În asta sunt implicați mulți specialiști deodată.Lucrătorii din laborator selectează și examinează un donator, fac capsule. Medicii hematologi monitorizează pacienții și îi duc la un consiliu unde discută despre potențialul transplant de microbiotă. Bacteriologii determină dacă pacientul este colonizat de flora patogenă. Biologii moleculari studiază compoziția microbiotei în diferite etape ale transplantului. Bioinformaticienii, care apoi fac o concluzie pe baza rezultatelor. Aceasta este o echipă întreagă, datorită căreia metoda de la obișnuit a devenit promițătoare.

Citeste mai mult:

Organismele vii au făcut Marte nelocuitor

Cea mai puternică coliziune a găurii negre din univers a dovedit teoria lui Einstein

Oasele din Peștera Terorii de la Miezul Nopții au fost examinate cu atenție și au găsit urme inexplicabile.