9. септембра 2015. године лекари са Научноистраживачког института за псе и трауматологију им. Р. М. Горбачова је прва применила метод фекалне трансплантације
Део здравог донора
Који проблем решава метода трансплантације фекалне микробиоте?
– Метода се појавила 1958. када је американацХирург Бен Ајсман је фекалном трансплантацијом излечио четири пацијента са псеудомембранозним колитисом. Метода је оживела захваљујући новим дијагностичким методама, као што је секвенцирање 16С. До средине 1990-их веровало се да десетине бактерија живе у цревима. А са појавом ове методе, испоставило се да постоје хиљаде врста у различитим пропорцијама. И свака особа има индивидуални састав микробиоте. Знајући ово, одлучили смо да испробамо методу трансплантације фекалне микробиоте код болести графт-версус-хост (ГВХД).
Секвенцирање гена 16С рРНА користи податке онуклеотидне секвенце изолованих чистих култура. Ген 16С рРНА је изабран као универзални маркер за идентификацију врста: присутан је у геномима свих прокариота и има релативно ниску варијабилност. Метода секвенцирања гена 16С рРНА је „златни стандард“ за тачност идентификације бактеријских врста.
Трансплантација фекалне микробиоте има за циљ дапобољшати резултате терапије за ГВХД са захваћеношћу црева. Прво смо истражили шта се дешава са микробиотом код пацијената са ГИ ГВХД. У поређењу са периодом пре ХСЦТ (трансплантације хематопоетских матичних ћелија), квалитативни и квантитативни састав микробиоте се значајно мења. Број активно-метаболизирајућих, анаеробних бактерија нагло се смањује, а повећава се број бактерија које изазивају упалу, појављује се изражена неравнотежа биолошког екосистема. Постојао је предлог: можемо ли променити ову неравнотежу пресађивањем микробиоте од здравог донора?
Олег Голошчапов
— Која је разлика између ГВХД црева и других инфламаторних болести црева које се лече истом методом?
- У разлозима појаве.Инфламаторна болест црева (ИБД) је генетски условљена промена у имунолошком систему. То су урођене промене које се појављују током времена. А ГВХД је последица трансплантације коштане сржи, у којој се човеку пресађује туђи имуни систем. Након трансплантације, у телу пацијента се појављују нове имуне ћелије које се "боре" са ткивима у непознатом организму - ово је болест графт-версус-хост, ГВХД.
Истовремено, реакцијаграфт против тумора: нове имуне ћелије проналазе и уништавају преостале ћелије рака. У многим случајевима, ово је неопходан процес за тело пацијента, подложан поузданој контроли лекова. Истовремено, клиничка слика ГВХД-а са захваћеношћу црева је заиста веома слична ИБД. И хистолошка слика је слична, и терапија.
Олег Голошчапов је завршио медицинску школу уАрмавир 1989. и Педијатријска медицинска академија Санкт Петербурга 1995. године. Усавршавао се и радио у Немачкој и Аустрији. Године 2021. одбранио је докторску дисертацију на тему „Улога фекалног калпротектина и корекције микробиоте у дијагностици и лечењу акутне болести трансплантата против домаћина гастроинтестиналног тракта након алогене трансплантације хематопоетских матичних ћелија крви“.
У 2017–2020, хематолози иреаниматори СРИ ДОГИТ им. Р. М. Горбачова и Дечји научно-клинички центар за инфективне болести спровели су студију која је проценила клиничку ефикасност методе трансплантације фекалне микробиоте (ФМТ) код тешких лезија црева код пацијената после трансплантације коштане сржи.
Група лекара који су радили на унапређењу и имплементацији ФМТ методе у редовну праксу клинике је 2022. године добила награду Воцатион Авард за проналазак нове методе лечења.
Последња шанса за спас
Како сте дошли до нове методе?
— Засновали смо се на принципима офф-лабел.Ако је стање пацијента тешко, традиционални лекови који се користе у терапији не помажу, динамика је негативна, онда се користи метода која помаже другој категорији пацијената у сличној ситуацији. На пример, знамо да је за клостридијалну инфекцију (инфекцију изазвану бактеријом Цлостридиум диффициле), традиционални третман трансплантација фекалне микробиоте. Зашто не покушати ако друге методе - имуносупресија, пробиотици, антибиотска терапија - не раде? Први смо у Русији трансплантирали девојчицу од 10 година. Пре тога, девојчица је била неуспешно лечена шест месеци и прогноза је била сумњива.
—&нбсп;Како је овај поступак технички изведен први пут?
Били смо изузетно технички неупућени. Графт је уведен ФГДС кроз радни канал ендоскопа иза дуоденума и колоноскопијом у цекум.
- Шта се променило од тада?
- Апсолутно све - на пример, методе администрацијетрансплантирати. Постоје традиционални начини испоруке - кроз горњи гастроинтестинални тракт (помоћу гастроскопа) и кроз доњи (колоноскоп, узлазни клистир). Клинички ефекат је приближно исти, али код инструменталних метода примене чешће се јављају компликације - перфорације, повраћање, регургитација, пнеумонија. Зато смо одлучили да кренемо другим путем, како не би било анестезије и инструменталних инвазивних метода порођаја. Тако се родила идеја о оралној испоруци смрзнутих капсула које садрже микробиоту.
графт
Прво се поставило питање где припремити графт,Ми то не радимо у нашој клиници. Контактирали смо лабораторију са којом смо радили заједничке студије фекалног калпротектина и договорили се да од њих урадимо трансплантацију. У почетку је то био пут покушаја и грешака, а затим су технологије тестиране и усавршене. Графт је прво донет у шприцовима и морао је да се убаци кроз цев или ФГДС у року од шест сати након производње. И тек тада се родила идеја са капсулама и замрзавањем. Извели смо много експеримената и развили читаву шему за додавање криопротектора бактеријама како не би биле уништене током криопрезервације. Тако смо добили веома добре резултате са одмрзавање и дошли до капсула.
Да бисте направили трансплантацију у капсулама, користитедонор кал. Даваоци су волонтери који се тестирају на компатибилност са пацијентом на основу резултата тестова крви и састава микробиоте. Донорски измет се помеша са глицеролом и стерилним шећерним сирупом, а затим стави у дупле тврде желатинске капсуле. Капсуле се пакују у стерилне контејнере и стављају у замрзивач.
- И сада користите само капсуле?
Да, и за одрасле и за децу.Једина ствар која би могла да представља проблем је узраст деце, испод четири године. Најмлађе дете које је узело капсулу имало је четири године. Требало је да се уверимо да га неће жвакати, не удахнути, већ прогутати.
Морао сам да замолим лабораторију да то урадикапсуле за обуку. Замрзнули су физиолошки раствор и недељу дана тренирали како би мали пацијент прогутао три до четири капсуле недељно. Све је прошло без компликација. Али шта је са млађом децом? У овом случају, узлазни клистир може бити обећавајући и сигуран метод примене.
Технике трансплантације
Скупа истраживања и доприноси филантропа
— Како вас подржава АдВита фонд?
— АдВита је помогла у скоро свим фазама.Шта је потребно да се изврши трансплантација микробиоте? Пацијент треба да прође плаћене тестове, а затим добије капсуле. Они су такође плаћени, али у суштини сав новац иде на преглед даваоца - потребно га је врло детаљно прегледати, а за то је потребна огромна сума новца. Стога, након што кажемо пацијенту да треба урадити студију, питамо да ли је пацијент регистрован у фонду. Ако је тако, ствари постају много лакше. Студија фецеса пацијента након трансплантације - такође АдВита. И, опет, секвенцирање је веома скупа студија. Овде је помогла и АдВита, захваљујући таквој подршци, напредовали смо у науци у погледу проучавања састава микробиоте током ФМТ.
—&нбсп;Судећи по броју публикација, осећа се да масовно примењујете овај метод.&нбсп;
— Ово није масовна примена, има их многоконтраиндикације. Поступак се не може извести након ХСЦТ-а, у којем леукоцити (гранулоцити и лимфоцити) још нису обновљени у периферној крви. Мора постојати имунитет, јер уношење великог броја микроба може изазвати заразне компликације.&нбсп;
Пацијенти са затајењем више органа су искључени.инсуфицијенција - јетрена, бубрежна, респираторна. Ово није пилула која лечи све. Па, усаглашеност пацијента (придржавање пацијента третману, степен спремности да прати рецепте и препоруке лекара) игра велику улогу. Ако пацијент сумња у ефикасност, не спроводимо процедуру.
—&нбсп;По обиму припреме и редоследу примене, сличан је трансплантацији коштане сржи. Да ли је упоредиво?
- Апсолутно упоредиво.Постоји пакет докумената, информисани пристанак. Приликом прве посете пацијент долази и упознаје се са новом методом терапије, најбоље код рођака. Пацијенту се говори о принципима методе терапије, детаљно се објашњавају нежељени и нежељени ефекти који се могу јавити. На шта треба обратити пажњу, шта је прихватљиво, шта је неприхватљиво. Пацијент пристаје на ово, учи код куће, гледа отворене изворе и доноси одлуку.
Графт капсуле
— Какав је тренутно статус рада на методи у вашој пракси? Да ли научна заједница очекује нешто од вас?&нбсп;
Не волим рутину.Наравно, узимамо наше пацијенте, сада их имамо троје-четворо, који су пре месец дана добили терапију. Али ако примените метод само у терапеутске сврхе и не истражујете даље, онда ће све бити прилично досадно. Потребне су нове тачке које још нису истражене, као што је деколонизација бактерија отпорних на антибиотике, када пацијенти имају и ГВХД са оштећењем црева и Клебсиелла пнеумониае (бактерија која изазива акутно оштећење црева и респираторног тракта) у цревима.
Шаљемо извештаје о нашим пацијентима групи,која се бави трансплантацијом микробиоте у Европском удружењу за трансплантацију коштане сржи (ЕБМТ). Ова група прикупља податке који укључују све трансплантације микробиоте урађене код пацијената са ГВХД-ом у свим клиникама. И објављује системске прегледе - велике чланке који говоре о методи, нежељеним ефектима, ефикасности и још много тога. И ту нисмо на последњем месту, јер смо, за разлику од изолованих случајева употребе у другим земљама, успели у директно рандомизованом клиничком испитивању.
—&нбсп;Који су стручњаци развили овај метод заједно са вама?
„Многи специјалисти су укључени у то одједном.Лабораторијски радници бирају и прегледају донора, праве капсуле. Хематолошки лекари прате пацијенте и одводе их на савет где разговарају о потенцијалној трансплантацији микробиоте. Бактериолози утврђују да ли је пацијент колонизован патогеном флором. Молекуларни биолози проучавају састав микробиоте у различитим фазама трансплантације. Биоинформатичари, који потом на основу резултата доносе закључак. Ово је цео тим, захваљујући коме је метода из обичног постала обећавајућа.
Опширније:
Живи организми су учинили Марс ненастањивим
Најмоћнији судар црне рупе у свемиру доказао је Ајнштајнову теорију
Кости у пећини поноћног страха пажљиво су прегледане и пронађени су необјашњиви отисци стопала.